Biología Molecular II
 
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Metodología:

Soluciones:

 

Las siguientes soluciones se prepararón para todos los equipos, a excepción de la acetona al 80% que es por equipo.

 

Medio de aislamiento de cloroplastos.

Se prepararon 500 ml de una solución con agua desionozada, que contenía sacarosa 400 mM, tricina 20 mM, KCl 20 mM, MgCl2 5 mM, ajustando el pH a 8.0 con KOH

 

Medio de reacción.

Se prepararón 500 ml de una solución con agua desionizada, que contenía sacarosa 100 mM, MgCl2 5 mM, KCl 10 mM, tricina 15 mM, KCN 0.5 mM,  ajustando el  pH a 8.0 con KOH.

 

Medio de reacción con DCPIP.

Se tomaron 400 ml de medio de transporte de electrones y se agregaro la cantidad necesaria para obtener una solución 0.3 mM de DCPIP en el medio de transporte de electrones.

 

10 ml de acetona al 80% (por equipo)

 

Herbicida comercial, DCMU (dicloro metil urea) 3 mM.

NOTA: Se prepararon 10 ml de DCMU 3mM disueltos en etanol, el DCMU preparado se encontro en el congelador, en donde se guardara nuevamente.

  

Hielo picado

Material de laboratorio:

  • Matraz de 250 ml
  • 2 vasos de precipitado de 50 ml
  • 6 tubos de centrífuga
  • 7 tubos de ensaye
  • 6 tubos de espectrofotómetro
  • 1 probeta de 100 ml
  • 1 probeta de 50 ml
  • 1 embudo
  • 2 pipetas graduadas de 10 ml
  • 2 pipetas graduadas de 5 ml
  • 2 pipetas graduadas de 1 ml
  • Recipiente metálico para hervir
  • Soporte, anillo, mechero y tela de asbesto
  • Agitadores de vidrio
  • Pipeta Pasteur
  • Agua destilada y desionizada
  • 1 mortero o una licuadora
  • 1 charola grande

 

Material que debe traer el elumno:

 

  • Cubreobjetos y portaobjetos
  • 1 lámpara de luz incandescente de 150 watts
  • 1 reloj (cronómetro)
  • Papel aluminio
  • Toallas de papel
  • Parafilm
  • Gasa
  • Papel filtro
  • Hojas frescas de espinaca

 

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