Procedimiento:

1.       Se pesaron 0.5 g de muestra vegetal del tejido que correspondiente.

2.       Se homogenizo el tejido en un mortero por separado y en frío con 5mL de acetona al 80% 

3.       Se vacio el homogenizado al tubo de centrifuga y se aforo a 5 mL con acetona al 80%

4.       Se centrifugo a 2000 rpm por 5 min y decanto el sobrenadante en un tubo de rosca tapar.

 

Determinación del contenido de clorofila

 

1.       Se calibro  el espectrofotómetro con acetona al 80%

2.       Se midió la absorbencia a 646nm, 663nm y 470nm de cada muestra.

 

Se calcular el contenido de clorofila total (µg de Cl/mL) utilizando la siguiente ecuación:

 

Clorofila a Ca=12.21A₆₆₃ -  2.81A₆₄₆

Clorofila b Cb=20.13 A₆₄₆ -  5.03 A₆₆₃

Xantofilas +carotenos =1000 A₄₇₀ – 3.27Ca - 104 Cb   

                                                        229

 

 

Separación de los pigmentos vegetales extraídos mediante una cromatografía en papel filtro.

 

Una vez que las muestras vegetales fueron extraídas y medidas en el espectro, se vaciaron cada una en una caja petri y se coloco un papel filtro (no se dejo caer el filtro totalmente en el solvente) se esperaron de 20 a 30 min y se observo la separación de pigmentos.